在众多定量蛋白质组学技术中,SILAC定量蛋白质组学(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)以其高精度、低偏倚的特性,在细胞水平的蛋白表达比较中占据重要地位。通过在细胞培养阶段引入稳定同位素标记氨基酸,SILAC实现了蛋白质的"
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一、技术原理概览 1、SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture) SILAC 基于以稳定同位素标记的氨基酸(如13C6-Lys、13C6-Arg)在细胞培养过程中被细胞代谢吸收并整合进蛋白质结构,实现“体内&
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蛋白质定量分析是科研、药物开发、疾病机制研究等领域的核心技术。而 SILAC技术(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)以其“体内代谢标记”“高准确度”“低处理误差&r
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Top-Down蛋白质组学的优势与局限:完整结构信息的代价与突破 随着蛋白质组学研究不断迈向更高分辨率与更细结构层级,Top-Down蛋白质组学(Top-Down Proteomics, TDP)因其对完整蛋白质进行直接质谱分析的能力,正在成为研究蛋白质异构体、翻译后修饰及功能多样性的关键工具。然而
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Top-Down蛋白质组学(Top-Down Proteomics, TDP)是通过对完整蛋白质分子的直接分析,实现蛋白质全序列、结构修饰和异构体(proteoform)的全面解析。与Bottom-Up方法相比,Top-Down技术能够更加准确地捕捉蛋白质的天然状态,尤其适用于研究翻译后修饰(PTM
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Top-Down质谱因其对完整蛋白质的直接分析能力,在蛋白质组学、结构生物学和翻译后修饰研究中逐渐成为不可或缺的工具。面对复杂蛋白亚型、修饰多态性和高质量精度需求,选择合适的质谱平台尤为关键。Orbitrap与FT-ICR是当前主流的两种高分辨率分析平台,各具技术优势,适用场景存在显著差异。本文聚焦
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在解析蛋白质组复杂性的过程中,如何全面识别蛋白质变体(proteoform)成为生物医学研究的关键命题。蛋白质变体由同一基因编码,却因可变剪接、翻译后修饰(PTMs)或点突变等因素产生结构与功能上的显著差异。准确鉴定这些变体,不仅是理解疾病机制、开发靶向药物的重要基础,也是推进精准医学的重要技术支撑
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毒液是一种高度进化的生化混合物,含有多种具有特异活性的蛋白和肽类分子。这些毒素在药物开发、靶点筛选和分子机制研究中具有重要应用价值。然而,毒液蛋白普遍存在高度同源性、剪接变异和丰富的翻译后修饰,使其难以被酶解-肽段级别分析方法全面解析。Top-Down蛋白质组学,作为直接分析完整蛋白质分子的策略,正
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毒液是蛇、蜘蛛、蝎子、蜥蜴等毒性动物通过专门腺体产生的复杂生化混合物,广泛含有蛋白质、多肽、酶和小分子。其成分结构多变、功能独特,是天然小分子药物库的重要来源。然而,毒液成分常常以不同翻译后修饰形式(proteoform)同时存在,结构差异细微,却决定截然不同的毒理功能。因此,在毒液组学研究中,To
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iTRAQ同位素标记技术,可对样本中的肽段 N 端与赖氨酸侧链进行共价标记,通过 4-plex 或 8-plex 多重标记,实现多样品同时定量。在质谱二级图谱(MS/MS)中,这些同质异构的标签裂解产生特征 reporter 离子,可用于精确比较不同处理组的肽丰度。基于 iTRAQ 技术的肽组学在炎
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