炎症性肠病（Inflammatory bowel disease, IBD）是指原因不明的一组非特异性慢性胃肠道炎症性疾病，DSS（葡聚糖硫酸钠）诱导的小鼠肠炎模型是研究炎症性肠病非常经典和广泛使用的实验方法。那么如何利用DSS建立小鼠肠炎模型呢？今天我们就来学习下。

为什么用DSS造模

葡聚糖硫酸钠盐（Dextran Sulfate Sodium Salt, DSS）是一种聚阴离子衍生物，其诱导结肠炎模型的机制通常认为与巨噬细胞功能失调、肠道菌群失调等有关。当动物饮用含有DSS的水溶液后，肠道黏膜屏障会被破坏，使得肠道黏膜通透性增加，原本被阻隔的细菌、内毒素等得以穿过受损的黏膜屏障，激活机体的免疫系统，引发肠道炎症反应，进而模拟炎症性肠病的病理特征。

实验操作步骤（以急性模型为例）

1.动物准备

品系选择：C57BL/6和BALb/c是最常用的品系。
年龄与性别：通常选择6-8周龄的健康雄性小鼠。每组至少6-8只，以减少个体差异。
适应性饲养：在实验前，将小鼠在SPF级动物房适应环境至少3-7天。

2.DSS溶液配制与给药

配制：准确称取DSS粉末（分子量36,000-50,000Da为佳）适量，溶于高压灭菌水或纯净饮用水中，搅拌至完全溶解。建议现用现配，每1-2天更换一次新鲜溶液。
浓度：根据品系和模型类型选择。例如，C57BL/6小鼠对DSS较敏感，常用2-3%；BALb/c小鼠可能需稍高浓度（如2.5-3.5%）。
给药：将DSS溶液作为小鼠唯一的饮用水来源。确保水瓶出水顺畅，每天记录饮水量。

3.日常观察与疾病活动指数（DAI）评分
从给予DSS当天起（记为第0天），每天同一时间观察并记录以下指标，进行DAI评分。DAI是体重下降、粪便性状和便血情况的综合评分，可以参考下表进行每日评估（评分体重下降百分比和粪便性状及便血情况）：

表 DAI指数评分表

DAI=（体重下降分数+粪便性状分数+便血分数）/3

通常，DAI分数显著升高表明建模成功。

模型评估与样本采集

在实验终点进行以下分析：

1.结肠形态观察
结肠长度：处死小鼠后，完整分离结肠（从盲肠到直肠）。结肠缩短是炎症的一个典型宏观指标。测量并记录各组平均长度。
结肠外观：观察是否有充血、水肿、壁增厚等情况。

2.组织病理学分析（金标准）
样本固定：将结肠内容物用预冷的PBS轻轻冲洗干净后，可纵向或横向卷成“瑞士卷”，或用福尔马林固定。
H&E染色：通过石蜡切片和H&E染色，在显微镜下观察炎性细胞浸润、隐窝结构破坏、杯状细胞丢失、溃疡形成等病理变化。
组织学评分：根据炎症严重程度和浸润深度进行半定量评分。

3.其他分子生物学检测
髓过氧化物酶（MPO）活性：反映中性粒细胞浸润的程度。
炎症因子检测：通过ELISA或qPCR检测结肠组织或血清中的炎症因子（如TNF-α，IL-6，IL-1β）水平。

肠道通透性检测：在处死前灌胃FITC-葡聚糖，一段时间后采集血清检测荧光强度，评估肠屏障功能。

图 DSS诱导的小鼠肠道炎症（A：结肠图片；B.结肠的内窥镜检查；C. H&E染色的结肠切片；

箭头指示：1. 缩短和出血的结肠；2. 脾脏肿大；3. 浅表性炎症；4. DSS处理小鼠的上皮侵蚀和免疫细胞浸润）

常见问题

1.DSS的批次、分子量以及小鼠的品系、周龄和饲养环境都会显著影响结果。不同批次的DSS效果可能有差异，建议先进行预实验。

2.死亡率过高：说明DSS浓度对于该品系小鼠过高。对策：适当降低DSS浓度（如从3%降至2.5%）。

3.症状不明显或无：可能是DSS浓度过低、小鼠品系耐受或饮水不足。对策：适当提高DSS浓度；确保水瓶畅通；检查小鼠是否真的饮用了DSS水。

4.组内个体差异大：可能由于笼养密度过高、饮水不均导致。对策：降低笼养密度（每笼不超过5只，建议2-3只），并每天检查水瓶。

成功构建DSS模型的关键在于细节控制，选择合适品系和周龄的小鼠，精确配制和给予DSS溶液，并进行严谨的日常观察和终点评估。建议在开始正式实验前，先用少量动物进行预实验，以确定最适合的具体DSS浓度。

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